Addgene aux antibiotiques pour la sélection des concentrations bactériennes
Informations d'arrière-plan
Les plasmides portent des gènes de résistance aux antibiotiques, qui confèrent une résistance aux antibiotiques aux bactéries qui les portent. La présence de ces gènes de résistance aux antibiotiques sur des plasmides permet aux chercheurs d'isoler facilement les bactéries contenant les plasmides de ceux qui ne le font pas par la sélection artificielle (à savoir leur culture ou dans un milieu contenant l'antibiotique).
Vous devriez vérifier votre fiche de plasmide ou la carte de plasmide pour déterminer quel antibiotique à ajouter à votre milieu LB ou des plaques de gélose LB.
préparation des antibiotiques
Créer une solution mère de votre antibiotique. Addgene recommande de faire 1000X solutions mères et de stockage aliquotes à -20 ° C.
Les concentrations d'antibiotiques:
Note: Sauf indication contraire, la poudre antibiotique peut être dissous dans dH2 0.
* Note: Carbenicillin peut être utilisé à la place de l'ampicilline. Carbénicilline est plus stable, il est donc potentiellement plus efficace pour sélectionner uniquement les bactéries contenant les plasmides d'intérêt (par exemple, moins de colonies satellites grandiront). Cependant, il est aussi plus cher.
Pour utiliser, diluer votre antibiotique dans votre milieu LB à 1: 1000. Par exemple, pour faire 100 ml de LB / milieu de croissance à l'ampicilline, ajouter 100 ul d'un stock d'ampicilline 100 mg / mL (stock 1000X) à 100 ml de LB.
Addgene est un dépôt de plasmide sans but lucratif. Nous archivons et distribuons des plasmides de haute qualité de vos collègues.
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