TLC stains_1

Une tache par CCM est utilisé dans le développement TLC pour révéler des composés qui ne sont pas visibles par l'UV. En outre, la détection sélective de composés est possible en choisissant la tache CCM appropriée.

Figure 1. Une plaque de CCM vu sous une lumière UV

introduction

Après élution d'une plaque de CCM, la première technique d'analyse doit toujours être la lumière UV. Cette technique est rapide, non destructive et permet la coloration à faire par la suite. Les composés qui apparaîtront typiquement sont des groupes aromatiques, des carbonyles a, ß-insatures, et d'autres composés contenant une conjugaison étendue. En utilisant le « gel de silice F254 » plaques de CCM (gel de silice qui émet une fluorescence avec une absorption à 254 nm), ces composés apparaissent sous forme de taches sombres (parce qu'ils « bloc » de la fluorescence par absorption de la lumière UV) sur un fond vert. Spots doivent être légèrement cerclés avec un crayon sous l'lampe UV car ils ne seront pas visibles une fois sorti sous la lampe UV. La plaque peut alors être teinté à l'aide d'une tache adéquate dans la liste suivante.

Table de recettes

Le tableau suivant répertorie les taches TLC, ainsi que leur utilisation générale, les composants et quelques notes sur les taches. Pour les procédures de préparation détaillées le long de l'exemple TLCs faire défiler vers le bas.

Procédures et exemples

p -Anisaldehyde (AAP)

A un mélange froid (0 ° C) de l'AcOH (5 ml) et EtOH (465 ml) a été ajoutée absolue p -anisaldehyde (12,5 mL) puis on ajoute lentement de l'acide sulfurique (17,5 ml). La solution limpide résultante a été chauffée à température ambiante et utilisé tel quel. L'excédent a été stocké dans le réfrigérateur.
Cette tache est la lumière et de l'oxydation sensible et va progressivement tourner rose / orange. La tache doit être conservé dans un bocal recouvert d'aluminium pendant l'utilisation, et l'excès doit être conservé au froid et dans l'obscurité. Une fois que la tache devient rouge foncé, il doit être jeté et fait à nouveau frais.

Ceric Ammonium Molybdate (CAM) - tache de Hanessian

l'acide chromique (K2 Cr2 O7)

A une solution froide (0 ° C) une solution d'acide sulfurique (100 ml, 20% v / v aq.) A été ajouté lentement du chromate de potassium (2,5 g). La solution rouge vif clair / orange résultante a été chauffée à température ambiante et utilisé tel quel. L'excédent a été stocké dans le réfrigérateur.

La 2,4-dinitrophénylhydrazine (DNP)

A un mélange froid (0 ° C) de l'eau (80 ml) et EtOH (200 ml) absolu, on a ajouté du 2,4-dinitrophénylhydrazine (12 g). A la solution orange vif trouble résultant a été lentement ajouté de l'acide sulfurique (60 ml) résultant en une solution orange clair qui a été réchauffé à température ambiante et utilisé tel quel. L'excédent a été stocké dans le réfrigérateur.

L'iode (I2)

Dans un mortier, broyer quelques cristaux d'iode avec un peu de gel de silice. Transférer dans un bocal avec un bouchon en plastique.
Les taches sont visualisées en laissant la plaque dans la chambre pendant quelques minutes jusqu'à ce que les taches brunissent. Une fois sorti de la chambre, les taches se fanent rapidement loin.
Cette tache peut être conservé pendant des mois sur le banc. Une fois fondu au blanc (par sublimation I2), il devrait être à nouveau frais.

l'acide phosphomolybdique (PMA)

l'acide phosphomolybdique (10 g) a été ajouté à froid (0 ° C) de l'EtOH (100 g) absolu puis réchauffé à la température ambiante. La suspension jaune trouble résultant a été filtré sur papier filtre pour donner une solution jaune claire et brillante qui a été utilisé tel quel. L'excédent a été stocké dans le réfrigérateur.
Cette tache peut être conservé pendant des mois sur le banc et dans le réfrigérateur. tache PMA se transformera progressivement vert mais ne porte pas la tache.

Le permanganate de potassium (KMnO4)

Dans un erlenmeyer de 1000 ml, on a ajouté de l'eau de manière séquentielle (600 ml), 5% aq. NaOH (10 ml) et de K2 CO3 (40 g). Une fois que la solution est devenue claire, KMnO4 (6 g) a été ajouté pour obtenir une solution violet foncé. La solution a été agité pendant 1 h à température ambiante. La solution violette résultante a été versée dans un pot pour une utilisation immédiate et l'excédent a été stocké dans le réfrigérateur.
Cette tache peut être conservé pendant des mois sur le banc et dans le réfrigérateur.

A une solution froide (0 ° C) de la solution claire incolore de vanilline (15 g) dans du EtOH absolu (250 ml) a été ajouté lentement de l'acide sulfurique (2,5 ml). La solution limpide résultante a été chauffée à température ambiante et utilisé tel quel. L'excédent a été stocké dans le réfrigérateur.
Cette tache est la lumière et de l'oxydation sensible et se transformera progressivement sombre. La tache doit être conservé dans un bocal recouvert d'aluminium pendant l'utilisation, et l'excès doit être conservé au froid et dans l'obscurité. Une fois que la tache devient noir, il doit être jeté et fait à nouveau frais.

Figure 2. plaques TLC colorées avec CAM, PMA, DNP, vanilline, KMnO4. p -anisaldehyde et I2