Chapitre cartographie génétique et la manipulation des mutations dominantes 8
Un bon exemple d'un allèle dominant chez C. elegans est le rol-6 (su1006) allèle, ce qui entraîne un phénotype de rouleau (ROL). animaux rol-6 (su1006) présentent le phénotype Rol quand ils sont des génotypes suivants: rol-6 / rol-6; rol-6 / +; ou + / rol-6. Étant donné que le phénotype Rol est observée quand une seule copie mutante de rol-6 (su10060) est présent, l'allèle rol-6 (su1006) est considéré comme dominant. Gardez à l'esprit que tous les allèles d'un gène particulier sera dominante; il existe plusieurs rol-6 allèles qui présentent des phénotypes récessifs. Dominance ou récessivité sont des propriétés spécifiques d'un allele. Ils ne sont pas des propriétés spécifiques du gène.
2. Isoler allèles dominants
3. Cartographie une mutation dominante
Le phénotype d'une mutation récessive disparaît quand on les croise dans une souche de mappage. Considérez lin-1. ce qui provoque un phénotype multivulval (Muv) lorsqu'il a traversé dans une souche telle que représentée sur la figure 3. On peut alors marquer la co-ségrégation de lin-1 et dpy-17 unc-32 de la manière habituelle en choisissant Muv non dpy UNCs et notant à quelle fréquence les phénotypes dpy Unc coségrègent avec lin-1Muv.
Considérons maintenant une mutation dominante qui, contrairement à lin-1. présente le phénotype mutant lorsque l'allèle est présent sous forme d'un hétérozygote. Lorsque nous croisons dans nos souches de cartographie chromosomique, tous les descendants hétérozygotes croisée présentera le phénotype mutant. Considérons une mutation dominante imaginaire, dom-1. comme le montre la figure 4. que nous allons dire les causes d'un phénotype tête à pointes. Ces dom-1 / + hétérozygotes affiche le phénotype tête hérissés et seront impossibles à distinguer homozygotes dom-1. Ainsi, nous ne pourrons pas marquer la séparation des dom-1 avec dpy-17. unc-32 en suivant les animaux à tête dopés parce que nous ne savons pas si les animaux sont dom-1 / + ou dom-1 / dom-1.
4. Les différents types de mutations dominantes
4.1. haploinsuffisance
4.2. allèles dominants négatifs
Un exemple bien connu d'un gène qui peut entraîner des mutations dominantes-négatives est la petite GTPase Ras. Ces allèles dominants négatifs de Ras ne sont pas eux-mêmes fonctionnels, car ils se lient de préférence le PIB et rester enfermés dans l'état inactif. De plus, ils empêchent également le facteur d'échange Ras (qui se fixe Ras-PIB et catalysant échange PIB / GTP et l'activation subséquente Ras) d'agir sur de type sauvage Ras, tuant essentiellement toute l'activité Ras.
4.3. Un gain de fonction dominante allèles (GOF)
4.4. alleles semi-dominants
Il est en fait assez typique pour les allèles dominants à se comporter de façon partiellement dominante. Les alleles sont semi-dominant désignés lorsque la pénétrance du phénotype chez les animaux hétérozygotes (dom-1 / +) est inférieure à celle observée pour les animaux homozygotes (dom-1 / dom-1). Dom-1. ce serait le cas si les animaux dom-1 / dom-1 étaient de 100% et la tête hérissés dom-1 / + animaux étaient 60% la tête hérissés. Ce point est important, car les stratégies de cartographie de base décrites ci-dessus assumaient la domination 100%. Dans la pratique, ce n'est pas nécessairement difficile à traiter, comme la présence de la mutation sera toujours visible par la génération suivante, comme cela est le cas pour tout allèle récessif. Ainsi la cartographie une mutation semi-dominante exigera simplement la descendance suivante pour une génération supplémentaire pour distinguer entre dom-1 / + et + / + animaux.
5. Les tests génétiques pour les classes de dominance
Pour tenter de faire la distinction entre les différentes classes de mutations dominantes, un certain nombre de tests génétiques peut être effectuée. Par exemple, pour déterminer si un phénotype mutant observé chez un animal hétérozygote est due à haploinsuffisance, on peut directement examiner les animaux qui sont hétérozygotes pour une carence chromosomique qui élimine la totalité du gène (ainsi qu'un certain nombre d'autres gènes probablement). Par ailleurs, si une suppression ou allèle nul du gène existe, en plaçant cette mutation sur le chromosome de type sauvage pourrait fournir une réponse encore plus propre. En outre, pour distinguer les effets de mutations haploinsufficieny hypermorphic, on peut en outre comparer les animaux homozygotes mutants (dom-1 / dom-1) avec les animaux qui sont hétérozygotes pour la mutation et la déficience (dom-1 / Df). Si les mutants homozygotes présentent un phénotype plus sévère que l'allèle mutant sur le déficit, alors il est probable que la mutation est au moins partiellement dominante, même si l'on peut avoir à la fois la domination et les effets haploinsuffisant pour le même allèle.
En terminant, nous renvoyons le lecteur à un certain nombre de publications traitant de divers types de mutations dominantes chez C. elegans (voir ci-dessous). Nous espérons que vous avez apprécié cette discussion des allèles dominants. Maintenant se remettre au travail, bon sang (A. Spencer).