Composition de gélose au sang, Préparation, utilisations et les types de Hémolyse
La gélose au sang est enrichi. milieu de croissance bactérienne. organismes, tels que pointilleux, streptocoque ne poussent pas bien sur les médias de croissance ordinaire. gélose au sang est un type de milieu de culture (gélose trypticase de soja enrichi avec 5% de sang de mouton) qui favorise la croissance des bactéries, telles que les streptocoques, qui, autrement, ne poussent pas.
Le sang contient des inhibiteurs de certaines bactéries telles que Neisseria et Haemophilus genres et la gélose au sang doit être chauffé pour inactiver ces inhibiteurs et de libérer des facteurs de croissance essentiels (par exemple des facteurs de V). Le chauffage de la gélose au sang convertit en gélose chocolat (sang chauffé prend une couleur chocolat) et favorise la croissance de ces bactéries.
agar-agar de sang se compose d'une base contenant une source de protéines (par exemple tryptones), digérer les protéines de soja, chlorure de sodium (NaCl), de l'agar et 5% de sang de mouton.
Composition du sang Agar:
- Digestion pancréatique de caséine
- Peptone condensé de farine de soja
- NaCl
- Gélose
- Eau distillée
Mélanger les ingrédients et ajuster le pH à 7,3. Faire bouillir pour dissoudre l'agar-agar, et stériliser à l'autoclave.
Procédure pour la préparation de gélose au sang
Contrôle de la qualité du sang Agar
- Le pH de la plage de gélose au sang 7,2 à 7,6 à la température ambiante.
- Inoculer les plaques avec 5 cultures de bouillon heure de Streptococcus pyogenes et S. pneumoniae. Ensemencer également une plaque de H. influenzae et traînée avec S. aureus (à savoir satellitisme Test).
- Incuber les plaques à une atmosphère enrichie en dioxyde de carbone à 35-37 ° C pendant une nuit.
- Vérifiez les caractéristiques de croissance de chaque espèce
- S. pyogenes. Beta-hémolyse
- S. pneumoniae. Alpha-hémolyse
- Satellitisme de H. influenzae
Utilisations de gélose au sang:
La gélose au sang a deux utilisations principales:
- L'isolement, l'identification (avec l'utilisation de l'un disque ou d'un disque optochine bacitracine et tester la sensibilité de l'isolat) et la sensibilité aux antibiotiques des streptocoques.
- Déterminer le type d'hémolyse, le cas échéant.
Gélose au sang et Hémolyse
Certaines espèces bactériennes produisent des enzymes extracellulaires que les globules rouges dans la lysent gélose au sang (hémolyse). Ces hémolysine (extotoxin) se diffuse radialement vers l'extérieur à partir de la colonie (ou colonies) provoquant la destruction totale ou partielle des globules rouges (RBC) dans le milieu de dénaturation et complète de l'hémoglobine dans les cellules à des produits incolores.
sont produits quatre types de gélose dans hémolyse de sang de mouton par Streptocoques savoir; Alpha hémolyse, bêta-hémolyse, gamma et hémolyse alpha prime ou large zone alpha hémolyse.
Hémolyse est mieux observée en examinant les colonies cultivées dans des conditions anaérobies ou inspection des colonies sous-surface.
Comment peut-on savoir si les colonies qu'ils observent sur une plaque ont provoqué alpha ou hémolyse bêta hémolyse?
Remarque: Pour connaître le type d'hémolyse de gélose au sang, la plaque de gélose au sang doit être maintenu jusqu'à une source lumineuse et observée avec la lumière provenant de l'arrière (lumière transmise).
Si les deux types d'hémolyse est présent, on observera une zone de colonie entourant une hémolyse croissante.
- Alpha hémolyse: lyse partielle de la RBC pour produire une coloration gris verdâtre ou brunâtre autour de la colonie. α est l'hémolyse due à la réduction de l'hémoglobine en méthémoglobine RBC dans le milieu entourant la colonie. Un grand nombre de streptocoque alpha hémolytiques font partie de la flore normale du corps. Mais la pneumonie Streptococcus e qui est aussi alpha hémolytiques provoque une grave pneumonie et d'autres maladies infectieuses mortelles.
S'il vous plaît noter ce
Partager:
Articles Liés