Préparation des réactifs de pulvérisation de Chromatographie
Recherche alphabétique des réactifs de pulvérisation de visualisation CCM
réactif de chloranile (tétrachloro-p-benzoquinone) pour la détection des phénols
Pulvériser avec une solution de 1 g tétrachloro-p-benzoquinone dans 100 ml de toluène
Le chlore / o-tolidine Pour la détection de composés de formation de chloramine, par exemple des dérivés d'urée, carbamate, des antibiotiques
Solution I: dissoudre 160mg o-tolidine dans de l'acide acétique glacial 30 ml, ajouter de l'eau distillée 500 ml et ajouter 1 g KI
Solution II: solution saturée d'o-tolidine dans de l'acide acétique dilué avec 0.85gm KI ajouté.
Chloramine-T
Dissoudre 5 g de réactif et de l'hydroxyde de sodium 0,5 g dans 100 ml d'eau.
Pour la détection de composés phénoliques.
acétate cuivrique
Dissoudre l'acétate cuivrique 3gm et 15mls acide phosphorique dans l'eau .. 85mls
Pour détecter Prostaglandines.
sulfate de cuivre / acide phosphorique utilisé comme réactif de carbonisation pour le polymère lié plaques de CCM.
Pulvériser avec une solution de 10 g de cuivre (II) sulfate acide phosphorique dans 10 ml d'eau 90mls.
Chauffer 5-30min à 110 ° C
Voir toutes les quelques minutes pour voir si des taches colorées ou fluorescentes à 254 et 360nm apparaissent.
Taches deviennent brun, gris ou noir.
l'acide chromique Voir sous dichromate de potassium / acide sulfurique
un Cyclodextrine
Dissoudre 1 g du réactif dans l'éthanol 100 ml.
Distinguer saturé à partir de lipides insaturés.
DDQ Reagent (dichlorodicyanobenzoquinone) pour la détection des phénols
Pulvériser avec une solution de 2 g 2,3-dichloro-5,6-dicyano-1,4-benzoquinone dans 100 ml de toluène
2 Dichlorofluorescéine
Dissoudre 0.2gm du réactif dans l'éthanol 100 ml.
Pour la détection de lipides saturés et insaturés.
Dichlorofluorescéine Pour la détection des édulcorants saccharine et le cyclamate
Dissoudre 0.2gm de dichlorofluorescéine dans l'éthanol 100 ml
Vaporiser et sécher à l'air chaud.
Vue sous lumière UV 360nm
Dichlorofluoréscéine / sel de sodium de fluorescéine Pour la détection de barbiturates N-substitués
Vaporiser avec une solution de 0,1 g dichlorofluorescéine dans l'éthanol 100 ml
Ensuite, par pulvérisation avec une solution de sel de sodium de fluorescéine 0,1 g dans 100 ml d'éthanol
2,6-Dichloro-4- chloroimide Pour la détection des antioxydants, des phénols, des amines, des hydrocarbures aromatiques, des produits pharmaceutiques, des herbicides à base d'acide phénoxyacétique, etc.
Pulvériser avec une solution fraîchement préparée de 1,0 g de 2,6-dichloroquinone-4-chloroimide dans de l'éthanol 100 ml.
10min thermique à 110 ° C et traiter avec de la vapeur de NH3
p-diméthylaminobenzaldéhyde (de réactif d'Ehrlich). Pour la détection des sulfonamides, des amines, des indoles et des alcaloïdes de l'ergot
Dissoudre 1 g de p-diméthylaminobenzaldéhyde dans 50 ml d'acide chlorhydrique et ajouter 50 ml de methanol
plaques chauffantes pendant 20 minutes à 50 ° C
4- diméthylaminocinnamaldéhyde Pour détecter indoles.
Dissoudre 0.2gm du réactif dans de l'éthanol de 80 ml et 20 ml conc. HCl.
N, N-diméthyl-p-phénylènediamine pour détecter les peroxydes organiques.
Dissoudre 1 g du réactif dans 80 ml de methanol et 20 ml conc. HCl.
Diphénylhexatriène Pour détecter les lipides.
Dissoudre 0,03 g du réactif dans du chloroforme 100 ml.
2, 4-dinitrophénylhydrazine Pour la détection des aldéhydes et cétones
Plaque de pulvérisation avec une solution de 0,4 g de 2,4-DNPH dans 100 ml d'acide chlorhydrique 2 N, 1 ml d'éthanol ajouter
Observer les taches jaune-rouge.
Diphénylamine Pour la détection de glycosides, glycolipides
Dissoudre 5 g diphénylamine dans l'éthanol de 50 ml, ajouter 40 ml conc. HCl et l'acide acétique glacial 10 ml
Pulvériser et plaque de recouvrement avec une autre plaque de verre, 30-40min thermique à 110 ° C jusqu'à ce que les taches apparaissent
Glycolipides produisent des taches bleues.
s-diphénylcarbazone Pour la détection de barbituriques
Spary avec une solution de 0,1 g s-diphénylcarbazone dans l'éthanol
Barbituriques donnent des taches pourpres
Diphenylcarbozone / sulfate mercurique Pour la détection de barbituriques.
DPC est de 0,01% dans le chloroforme. sulfate mercurique est de 0,01% dans de l'acide sulfurique dilué.
2,2-diphénylpicrylhydrazyle Pour la détection des aldéhydes et cétones
Dissoudre 15 mg de 2,2-DPPH dans du chloroforme 25ml
Vaporisateur, 5-10 min à la chaleur à 110 ° C
Des taches jaunes sur un fond violet.
Dithizone Pour la détection des ions de métaux lourds
Dissoudre 20 mg dithizone dans de l'acétone 100 ml, conserver dans une bouteille brune dans un réfrigérateur
Vaporiser avec une solution de dithizone
Pulvériser avec 25% de solution d'ammoniac
Dittmer et Lester Voir bleu Molybdène
Dragendorffs réactif. Pour détecter des alcaloïdes et des composés d'azote quaternaire
Dissoudre 0.11gm iodure de potassium et 0.18gm bismuth sous-nitrate (OBiNO3) dans 20 ml d'acide acétique et compléter à 100 ml.
réactif Erhlich Voir p-diméthylaminobenzaldéhyde
Ethanolamine diphenylborate (réactif de flavone selon la Neu) pour la détection de flavonoïdes
1. Dissoudre 1 g de diphenylborate d'éthanolamine dans 100 ml de methanol
2. Dissoudre 5 g glycol polyyethylene dans l'éthanol 100 ml
Pulvérisez de la solution 1, puis la solution 2. Observer à 365nm lumière UV
réactif Erhlich Voir p-diméthylaminobenzaldéhyde
Voir réactif Emerson hexa-cyanoférrate 4-aminoantipyrine / potassium (III)
Gentiane Violet / Pour la détection des Bromine lipides
Vaporiser le violet de gentiane de 0,1 g (cristal violet) dans 100 ml de methanol sur la plaque et placer dans un réservoir contenant de la vapeur de brome.
Recherchez les taches bleues sur un fond jaune.
réactif de Gibbs Pour la détection des phénols.
Dissoudre 3 g de 2,6-dibromo-N-chloro-p-benzoquinone imine dans 100 ml de methanol.
HPT réactif pour la détection des acides biliaires.
Dissoudre 0.025gm de 8-hydroxy-1,3,6-pyrenetrisulphonic sel trisodique de l'acide dans 100 ml de methanol.
Hydroxylamine / chlorure de fer (III) pour la détection des amides, des lactones, des esters d'acides carboxyliques et d'anhydrides
Solution I: préparer une solution de chlorure d'hydroxylammonium 7g dans 100 ml de methanol et une solution de 7,2 g d'hydroxyde de potassium dans 100 ml de methanol. Mélanger les deux solutions ensemble et filtrer.
Solution II: Dissoudre 2 g de fer (III) et 1 ml conc. HCl dans 100 ml d'eau.
plaque sécher à l'air
Vaporisez la solution I, puis avec une solution II
Iodoplatinate pour détecter des alcaloïdes, des amines et des composés organiques de l'azote.
Dissoudre 0.15gm chloroplatinate de potassium et d'iodure de potassium à 3 g dans de l'acide chlorhydrique dilué 100 ml.
acide Iodoplatinic Pour la détection des alcaloïdes, les métabolites de cocaïne, les amines, les analgésiques et la biotine.
Dissoudre 3ml. d'acide chloroplatinique (de hexachloroplatinate d'hydrogène) à 100 ml. l'eau, puis mélanger avec une solution de 6gm d'iodure de potassium dans 100 ml d'eau.
Fer (III) chlorure / potassium hexacyanoferrate / arséniate de sodium (selon Patterson Clements)
Pour la détection de composés d'iode, e..g. hormones de la glande thyroïde
Solution I: dissoudre hexahydrate de chlorure de fer 2.7gm (III) dans 100 ml d'acide chlorhydrique 2N
Solution II: dissoudre hexacyanoferrate de potassium dans 100 ml d'eau 3.5gm
Solution III: On dissout 3,8 g de trioxyde d'arsenic dans une solution d'hydroxyde de sodium 2N 25 ml chauffant légèrement, refroidir à 5 ° C, et ajouter de l'acide sulfurique de 50 ml de 2N, remplir à 200ml avec de l'eau
Immédiatement avant l'utilisation de la solution 5 ml de mélange I, solution de 5ml II et III solution de 1 ml
Isatine Pour détecter la proline, l'hydroxyproline et d'autres acides aminés et des peptides.
0.2gm isatine dans 100 ml de methanol.
tétraacétate de plomb / 2,7-dichlorofluorescéine pour la détection de diols vicinaux, des glycosides et des phénols, par exemple, acides de sucre
Solutions:
1. 2 g du tétraacétate de plomb dans de l'acide acétique glacial 100 ml
2. 2,7 1gm Dichloro-éthanol 100 ml
Mélanger 5 ml de chacune des solutions 1 et 2 et compléter à 200 ml avec du toluène sec. Cette solution de réactif est stable pendant seulement environ 2 heures.
Ninhydrine Pour la détection des acides aminés, les amines, les sucres aminés (amphétamines).
Dissoudre 0.2gm ninhydrine dans de l'éthanol 100 ml, ou dans de l'eau et de l'acétone 94ml de 6 ml.
Vaporiser et de la chaleur à 110 ° C jusqu'à ce que des taches rougeâtres apparaissent.
réactif ninhydrine Fixateur
éthanol acidifié contenant 1% de saturation nitrate cuivrique.
Fixatif pour ninhydrine chromatogrammes.
Ninhydrine / acétate de cadmium Pour la détection des acides aminés et des amines hétérocycliques
Dissoudre 1 g de ninhydrine et de l'acétate de cadmium de 2,5 g dans de l'acide acétique glacial 10 ml et compléter à 500 ml avec de l'éthanol.
Pulvériser et 20min à la chaleur à 120 ° C
Rouge, rose, ou des taches pourpres sont visibles.
Ninhydrine / pyridine / acide acétique glacial Pour la détection des peptides
Pulvériser avec une solution de 1 g de ninhydrine dans de la pyridine 95mls et 5 ml d'acide acétique glacial.
Chauffer 5 min à 100 ° C
L'acide nitrique / éthanol Pour la détection des amines et des alcaloïdes
Vaporiser avec une solution de 50 gouttes conc. l'acide nitrique dans de l'éthanol 100 ml. Si nécessaire, chauffer à 120 ° C pendant un certain temps.
chlorhydrate de N-4-nitrobenzyl-N-n-propylamine (APNB)
0,2 millimole de réactif
Pour la détection d'isocyanates.
1. orcinol Ferric Chloride (réactif de Bials)
Pour les sucres de détection, glycosides et sulfolipides.
Dissoudre le chlorure ferrique 0.9gm et 0.55gm orcinol dans 80mls éthanol et 20 ml de HCl.
2. orcinol (réactif de Bials)
Pour la détection de glycosides, glycolipides
Dissoudre 0,1 g orcinol dans 40.7ml conc. HCl, ajouter 1 ml de 1% de fer (111) du chlorure, et diluer à 100 ml
Vaporiser et chauffer à 80 ° C pendant 90 minutes.
Glycolipides produisent des taches violettes.
Oxime (8-hydroxyquinoline)
Dissoudre 0,25 g de 8o ml etanol et 20 ml d'eau
Pour la détection de cations, Al, Cr, Fe, Co, Ni, Mn, Zn.
rhodamine B
Pour détecter les lipides et
Pour la détection des métaux (Au, Bi, Cd, Fe, Hg, Mo, Ti, V, et W.)
Dissoudre 0.25gm de Regent dans 100 ml d'éthanol ou d'acétone.
Placer les chromatogrammes pulvérisées dans une atmosphère d'ammoniac, augmente la sensibilité.
rhodamine 6G
Pour détecter les lipides.
Dissoudre 0,01 g de Rhodamine 6G dans 100 ml de chlorure de méthylène.
1. Acide rubéanique (dithioxide de sodium)
Pour la détection des cations gb111A et 111B
Dissoudre 1 g de réactif dans 100 ml d'éthanol.
2. L'acide rubéanique pour la détection des ions de métaux lourds
Pulvériser avec une solution d'acide rubéanique 0,5 g dans 100 ml d'éthanol
brièvement sèche
Pulvériser avec 25% de solution d'ammoniac ou dans une chambre avec de la vapeur d'ammoniac
Tétracyanoéthylène - TCNE réactif pour la détection d'hydrocarbures aromatiques et les hétérocycles aromatiques, des amines et des phénols,
Dissoudre 0,5 - 1,0 g tétracyanoéthylène dans le dichlorométhane ou le toluène, 100 ml.
On chauffe à 100 ° C pendant une courte période.
Tetranitrodiphenyl Pour la détection des glycosides cardiaques
Solution I: solution saturée de 2,3’ , 4,4'-tetranitrodiphenyl dans du toluène
Solution II: dissoudre 10 g d'hydroxyde de potassium à 50 ml d'eau et 50 ml de methanol
Vaporiser avec I solution, sèche à la température ambiante, puis pulvériser avec une solution II.
taches bleues sont observées.
bleu tétrazolium Pour la détection de corticostéroïdes et d'autres composés réducteurs.
Solution 1. Dissoudre 0,5 g de tétrazolium 50 ml d'eau et 50 ml de methanol.
Solution II. Maquillage NaOH 100 ml 6M.
Pulvériser avec un mélange égal des deux solutions.
taches violettes à la température ambiante ou avec un léger réchauffement.
Thymol / acide sulfurique Pour la détection des sucres
Vaporiser avec une solution de thymol 0,5g dans l'éthanol de 95 ml et ajoutez 5 ml conc. l'acide sulfurique avec prudence.
15-20min thermique à 120 ° C
Les sucres présentent des taches roses.
Tin (IV) chlorure Pour la détection des triterpènes, stérols, des stéroïdes, des phénols et polyphénols
Pulvériser avec du chlorure d'étain 10 ml (IV) dans 80 ml de chloroforme et 80 ml d'acide acétique glacial.
Chauffer la couche de 5-10 minutes à 100 ° C et inspecter la longueur d'onde visible et à long lumière UV.
réactif de TNF (de trinitrofluorénone) pour la détection des phénols
Pulvériser avec une solution de 2 g 2,4,7-trinitrofluorénone dans 100 ml de toluène,
o-tolidine, diazoté Pour la détection des phénols
solution Tolidine - Make up o-tolidine 5 g et conc 14ml. l'acide chlorhydrique dans 100 ml d'eau
solution de nitrate - Dissoudre 10 g de nitrate de sodium dans 100 ml d'eau, fraîchement préparée
Mélanger une solution de 20 ml de tolidine et une solution de nitrate de 20 ml à 0 ° C en agitant constamment.
La solution de pulvérisation est stable pendant environ 2-3 heures.
Remarque: Après la pulvérisation, il peut prendre plusieurs heures jusqu'à ce que des taches de couleur sont formées.
l'acide p-toluènesulfonique Pour la détection des stéroïdes, des flavonoïdes et des catéchines
Dissoudre 20gm d'acide p-toluènesulfonique dans du chloroforme et on chauffe quelques minutes à 100 ° C.
Inspecter sous lumière UV de longue longueur d'onde.
l'acide trichloroacétique Pour la détection des stéroïdes, des glucosides digitaliques, les alcaloïdes de veratrum et de la vitamine D
solution de pulvérisation I: Dissoudre 25g d'acide trichloracétique dans 100 ml de chloroforme.
Pulvériser la solution II - pour la vitamine D - Dissoudre 1 g d'acide trichloracétique dans 100 ml de chloroforme.
solution de pulvérisation III - pour glucosides digitaliques - Dissoudre l'acide trichloroacétique de 3,3 g dans 100 ml de chloroforme et ajouter 1 à 2 gouttes de peroxyde d'hydrogène.
Pulvérisation avec la solution appropriée, 5-10 min à la chaleur à 120 ° C et à observer la lumière normale et le long de la lumière UV.
Inspecter les taches à la lumière du jour et à la lumière UV de longue longueur d'onde.
l'acide trifluoracétique Pour la détection des stéroïdes
Pulvériser avec une solution d'acide trifluoroacétique à 1 g dans 100 ml de chloroforme et 5 min thermique à 120 ° C
Triéthanolamine Pour l'amélioration des espèces de fluorescence
Dissoudre 20gm de réactif dans 100 ml d'isopropanol
l'acide phosphotungstique Voir sous Phosphotungstic acide
Lumière ultraviolette - fluorescence Examiner le chromatogramme séché sous la lumière UV à la fois 254 et 360nm.
Ultraviolet Light - trempe Pour la détection de divers composés qui absorbent la lumière UV 254 nm
Cette lumière de longueur d'onde apparaît comme des taches sombres contre une fluorescence verte ou blanche provoquée par l'activation UV de l'indicateur fluorescent dans la plaque.
Urée / acide chlorhydrique Pour la détection des sucres
Pulvériser avec une solution d'urée de 5 g dans 20 ml d'acide chlorhydrique 2M, 100 ml avec de l'éthanol ajouté et on chauffe à 100 ° C.
Les cétoses et les oligosaccharides contenant cétoses virent au bleu.