Protocoles - laboratoire de Untergasser

Préparation de l'ADN - des bactéries

ADN Miniprep. - ébullition rapide
Mon protocole préféré pour préparer. L'ADN de E. coli, si vous avez plus de 12 échantillons son plus rapide qu'un kit commercial.

ADN Miniprep - alcaline Lyse
Mon protocole préféré pour préparer. L'ADN de Agrobacterium, il est également idéal pour E. coli.

ADN Miniprep - alcaline Lyse pour BACs
Mon protocole préféré pour préparer. . BACs Il est a quelques légères modifications au protocole précédent.

ADN Miniprep - rapide Sale alcalin Lyse
Un protocole de lyse alcaline très rapide. Il est populaire parce que vous versez un peu plus les solvants.

ADN-Maxiprep - alcaline Lyse
Mon protocole préféré pour Maxipreps. Il prend son temps, mais vous obtenez d'énormes quantités d'ADN.

Préparation de l'ADN

ADN Miniprep utilisant CTAB
Le meilleur protocole pour obtenir de grandes quantités d'ADN de matériel végétal.

Préparation d'ARN

Trizol combinée avec des colonnes
Le meilleur protocole pour obtenir beaucoup d'ARN qui est aussi propre.

L'ARN en utilisant du phénol chaud Miniprep
Un protocole dangereux pour extraire l'ARN de toutes sortes de tissus.

ARN Miniprep utilisant CTAB
Le meilleur protocole pour obtenir de grandes quantités d'ARN à partir de matériel végétal.

ARN Miniprep utilisant le 2-butoxyéthanol
Le meilleur protocole pour obtenir l'ARN à partir de matières riches en phénols, des sucres ou des composés oxydants.

ARN Midiprep utilisant le 2-butoxyéthanol
Le meilleur protocole pour obtenir l'ARN à partir de matières riches en phénols, des sucres ou des composés oxydants.

Méthodes générales de clonage

ligature
Comment faire une ligature Successfull. Ceci est un protocole de base.

ARN et l'ADN séparé
Mon protocole favori pour obtenir l'ADN ou de l'ARN pur - ou les deux! Il vient workes.

synthèse d'ADNc en utilisant Superscript II
Mon protocole préféré pour la synthèse d'ADNc. Prend un peu, mais workes parfaitement.

Le clonage avec Gateway Technology (basé sur le système de Invitrogen)

TOPO-réaction
Comment faire une réaction avec le vecteur TOPO Successfull pENTR-D / Topo de Invitrogen.

Passerelle BP-réaction II
Comment faire un clone pENTR à partir d'un produit de PCR et un clone pDONR.

Classique LR-réaction II
Comment rendre votre clone finale d'un clone pENTR et un clone pDEST.

Multiple Réaction passerelle II sans Mastermix
Comment rendre votre clone final à partir de trois clones pENTR et un clone pDEST.

Multiple Réaction passerelle II à l'aide d'un Mastermix
Comment rendre votre clone final à partir de trois clones pENTR et un clone pDEST.

Les cellules compétentes

Stocks de démarrage Glycérine
Comment faire des stocks de glycérol démarrage pour accélérer la production de cellules compétentes.

Vecteurs Adneoviral

Le clonage avec la première génération de passerelle de la technologie

Old protocoles de passerelle en utilisant la première version des enzymes, étaient tampon et l'enzyme ont été fournis séparément. En raison de la faible stabilité, je ne recommande pas d'utiliser ces protocoles.

Passerelle BP-réaction
Comment faire un clone pENTR à partir d'un produit de PCR et un clone pDONR.

Classique LR-réaction
Comment rendre votre clone finale d'un clone pENTR et un clone pDEST.

Passerelle multiples
Comment rendre votre clone final à partir de trois clones pENTR et un clone pDEST.

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