Sciences de l'école
Une plaque de gélose striée de micro-organismes isolés à partir d'une éponge en eau profonde.
Une plaque de gélose est une boîte de Petri stérile contenant de la gélose en plus des nutriments, et est utilisé pour la culture des bactéries ou des champignons. En général, les substances « en sélectionnant » sont également ajoutés à la plaque, tels que des antibiotiques.
Préparation des plaques d'agar Modifier
La plupart des types d'agar sont achetés pré-préparés sous forme de poudre, bien qu'il soit possible d'acheter un mélange de gélose de base et ajouter des éléments nutritifs séparément. Pour un mélange standard typique d'agar Lauria-Bertani (LB), ce qui suit est ajouté par litre d'eau distillée tout sur un agitateur automatique:
- 10 g d'un acide aminé (en général tryptone peptone ou)
- 5 g d'extrait de levure
- 5 g de NaCl
- 15 g d'agarose (en omettant cette étape produit liquide LB)
- Les mains sont soigneusement lavés avec du savon antimicrobien et l'eau chaude.
- Le banc est essuyée avec de l'éthanol ou un autre désinfectant
- Un brûleur Bunsen est mis en place avec une douce flamme bleue. Il sera utilisé pour stériliser la bouche du flacon, et sera fournit également un environnement raisonnablement stérile à proximité. Ce sera également utilisé pour la flamme des plaques qui développent des bulles de coulée.
- Le nombre de plaques à coulé sont placés sur le banc, avec leurs paupières encore.
- La feuille d'aluminium est enlevé et jeté. La laine de coton est enlevé avec le petit doigt. Elle se déroule dans le petit doigt tout le temps, pas mis bas.
- L'embouchure de la fiole est brûlé pour tuer les bactéries à l'extérieur de la jante.
- Le couvercle de la plaque est levée juste assez haut pour permettre à la plaque à verser, et le plat est rapidement rempli à moitié avec de l'agar.
- Le couvercle est remplacé, la plaque tourner doucement pour assurer une distribution uniforme de l'agar-agar fondu, puis laissé au repos sur le banc pendant au moins 20 minutes pour solidifier.
- Une fois que toutes les plaques sont versées, la bouche du flacon est reflamed et la laine de coton réinséré. Tout agar utilisé est toujours stérile.
Pour permettre la traçabilité, un numéro de lot attribué au flacon est écrit sur les plaques coulées avec elle.
Avant l'inoculation, les informations importantes sont écrites sur le fond des plaques, à proximité de la jante:
- date d'inoculation
- température d'incubation
- durée d'incubation
- micro-organisme inoculé
Modifier strie
La méthode la plus courante d'inoculer une plaque de gélose est laisser de traces.
Que faut-il est que les cellules bactériennes simples s'isolés par les stries, et lorsque la plaque est incubée, formant des colonies distinctes qui ont commencé à partir d'une seule bactérie chacun.
arbre de Noël Modifier
Ce modèle est utilisé pour la culture de l'urine. Une petite boucle est plongé dans l'urine, et une seule série de est faite au milieu de la plaque de gélose. La boucle est balancé dans et hors passer par la séquence plusieurs fois à angle droit à la première séquence.
culture Stab Modifier
Une aiguille est flambé ensuite immergé dans la culture. Il est ensuite poignardé dans un petit pot stérile de gélose nutritive. Si les bactéries sont anaérobies ils grandiront, sinon ils ne le font pas.
Préparation d'une pelouse Modifier
Une pelouse est souvent utilisé pour tester la sensibilité aux antibiotiques, ou pour le travail avec les bactériophages. Ce qui est nécessaire est une diffusion régulière et complète de la croissance sur toute la plaque d'agar (une « pelouse »). Autour d'un disque antibiotique, il y aura une zone claire dans laquelle la croissance bactérienne est inhibée; le diamètre de cette zone peut être mesurée pour déterminer si cette souche bactérienne est résistante à l'antibiotique.
Une façon de préparer une pelouse est d'utiliser un 0,5 suspension McFarland de bactéries dans une solution saline (ce qui signifie que la solution saline est faite juste légèrement trouble). Un écouvillon stérile est plongé dans cette suspension, puis il est déplacé d'un côté à l'autre vers le bas l'ensemble de la gélose plaque de façon toute la zone est couverte. La plaque est tournée de 90 ° et l'écouvillon déplacé à l'autre côté perpedicularly pour la première fois. Cela se fait une fois de plus avec le tampon tourné à 45 °.
L'incubation des plaques d'agar Modifier
Les plaques sont mises à incuber à l'envers pour éviter que des gouttes de collecte de la condensation sur la surface ensemencée.
Des plaques sont incubées à 37 ° C dans une atmosphère à 5% de CO2: la température et des conditions dans lesquelles certaines des bactéries de l'organisme va croître. incubateurs spéciaux peuvent maintenir ces conditions.
Certaines bactéries doivent être incubées dans des conditions anaérobies (sans oxygène). Ceux-ci peuvent être placés dans des conteneurs, avec une substance qui élimine l'oxygène, et le récipient étanche placé dans l'incubateur normal.
Champignons et certaines bactéries (par exemple, Yersinia sp.), Doivent être mis en incubation légèrement plus froide. Ceci est habituellement de 30 ° C et l'air ambiant est souvent utilisé.
les bactéries se développent à des températures Yaourt beaucoup plus élevées (en général
45 ° C). Ils sont donc particulally sûr à utiliser lorsque la microbiologie enseignement, en particulier aux enfants.
Campylobacter est une espèce bactérienne difficile à cultiver. Il a besoin des plaques d'agar spéciales, ainsi que son propre environnement microaérophile.
Types de plaques d'agar Modifier
élimination sûre des plaques d'agar Modifier
Lorsque toutes les manipulations sont effectuées, le banc est désinfecté une fois de plus. La dernière étape devrait être de se laver les mains soigneusement avec du savon antimicrobien et l'eau chaude avant de quitter le laboratoire.